本课程全面覆盖从基因组调研到三维结构解析的全链条分析。第一部分介绍GenomeScope与Smudgeplot基于K‑mer估算基因组大小、杂合度与重复序列,并详解Jellyfish/KMC计算频率及参数调优策略。第二部分聚焦de novo组装,主讲Hifiasm(支持HiFi/超长ONT/Hi‑C数据,输出分型组装)、3D‑DNA(Hi‑C辅助纠错与染色体挂载)及JBAT交互调图(修复错配、易位、倒位),并针对多倍体基因组引入ALLHiC流程(修剪、分区、救援、优化、构建)。质量评估模块涵盖GAEP流程、BUSCO(基因空间完整性)、Merqury(K‑mer准确性QV)及LAI(LTR重复完整性)。第三部分为基因组注释,包括EDTA(全自动TE注释与库构建)和GeMoMa(基于同源与RNA‑seq的编码基因预测)。第四部分聚焦Hi‑C三维基因组分析,讲解HiC‑Pro质控(有效互作比例)、A/B区室鉴定(hicPCA)、TAD检测(hicFindTADs隔离得分)及染色质环识别(hicHyperoptDetectLoops)。课程强调参数调优与结果解读,为高质量基因组组装、注释及三维功能研究提供系统性指导。