主权项:
1.一种糖基化核桃肽在包埋核桃油中的应用,其特征在于,所述糖基化核桃肽的制备方法具体包括以下步骤:步骤(1)由核桃粕中提取核桃蛋白,将核桃蛋白溶解,调节pH,加入木瓜蛋白酶进行酶解反应,超滤分离获得MW>30KDa的核桃蛋白多肽;步骤(2)将获得MW>30KDa的核桃蛋白多肽与麦芽糊精进行糖基化反应;步骤(3)冰浴结束反应,使用截留膜在蒸馏水中透析,除去未反应的糖,冻干制得糖基化核桃肽;步骤(1)所述核桃粕的处理过程如下:将核桃粕45℃-50℃进行烘干,粉碎过60目筛,采用核桃粕:正己烷以1:5w/v料液比搅拌浸提2h,然后进行抽滤,收集残渣进行二次提取,过滤收集脱脂核桃粕粉,置于通风橱挥干残留溶剂;将脱脂核桃粕用粉碎机二次粉碎后过150目筛,即为核桃脱脂粕粉,置于4℃下冷藏备用;按照质量体积比1∶18-20的比例混合脱脂核桃粕粉与去离子水,0.8-1.5M NaOH调pH到10-11,在50-55℃水浴下搅拌1-2h,离心取上清液,用0.8-1.5M HCl调pH为4.0-5.0,静置1-2h,离心,洗涤沉淀,调节pH至中性,经冷冻干燥得到核桃蛋白提取物;将核桃蛋白加入提前预热的去离子水于50-60℃溶解,配成3-5%的核桃蛋白溶液,并调节pH至6.5-7.0,加入3%w/v木瓜蛋白酶迅速混匀,在50-55℃下边水浴边搅拌40-50min进行酶解,沸水浴15-20min灭酶,冰浴,离心,保留上清酶解液;室温条件下将酶解液进行超滤,控制酶解液在20-30mL时加水补充至1L,得到MW>30KDa的核桃肽进行冷冻干燥后备用;步骤(3)详细操作如下:将浓度为15mg/mL MW>30KDa的核桃肽与麦芽糊精按1∶2混合,搅拌溶解,以0.8-1.5M NaOH调节混合溶液的pH至8.0-9.0,室温条件下搅拌20-40min,在3-6℃冰箱下水合10-14h;然后将混合溶液置于恒温水浴锅80℃中进行反应8h,冰浴结束反应;使用截留膜在蒸馏水3-5℃透析20-25h,除去未反应的糖,冻干制得糖基化核桃肽。